名侦探柯南小兰被h(盘点动漫里用头发当武器的美少女们,最后一个等于慢性自杀)
名侦探柯南小兰被h文章列表:
- 1、盘点动漫里用头发当武器的美少女们,最后一个等于慢性自杀
- 2、输掉25亿身家后,她还是富婆
- 3、小兰翻墙抓手PRRSV受体--猪病小兰的时空之旅【连载-13】
- 4、小蓝单车,0.5元/h,扫码3秒开锁,押金比摩拜便宜200!
- 5、[动漫资讯]网友:柯南的红方阵容是不是太强了
盘点动漫里用头发当武器的美少女们,最后一个等于慢性自杀
动漫里的美少女很多拥有一头长发,她们妩媚动人,但随时有可能把头发当做武器使,就很可怕了。
1.全职猎人
庞姆
庞姆最开始的形象可是头发长的基本看不到脸,整个人都是颓废状态,之后的大变身简直惊艳,在被改造后,有了暗黑鬼妇神的能力,用头发包裹全身增强攻防力度。
2.妖精的尾巴
芙蕾雅
能自由控制头发,原本是性格扭曲,在与露西决战时操控头发各种虐露西,不过之后也被露西感化,重拾善良的本心了。
3.信蜂
妮琪
金色的头发可以随意变形,无限伸长,变成六把剑也没问题,威力还不小,虽然是个Loli,也不能大意。
4.滑头鬼之孙
毛倡妓
她的头发不仅是自己的武器也是首无武器的制作材料,真是方便,也说明她的头发强有力,正常情况下是个美人。
5.侵略乌贼娘
乌贼娘
蓝色的头发其实为触手,可以用触手做各种各样的事,可以说很稀奇可爱了,发光可以做到,连打架子鼓都可以,有点皮。
6.金色暗影
伊芙
全身都可以变为武器,是个高级的美少女杀手,但也是个三无少女,小暗被称作全身凶器,也是很危险了。
7.死囚乐园
鹰见水名月
外表看似柔弱,其实严重暴力,可以把血液渗入头发形成武器鞭子,多的来还可以变成绳索,此情此景很可怕。
8. 暗杀教室
茅野枫
外表看上去也是单纯可爱的美少女,然而也是一个暗藏杀机的高手,本职还是个演员,所以演技炸裂,在显露真身时,头发变长成触手可用来攻击对方,隐藏了这么久报仇也是用心良苦了。
9.绯弹的亚里亚
峰理子
拥有双剑双枪的S级武侦,不仅是双手可以动用武力,头发也可以操控,童颜巨乳腹黑属性的双马尾少女也是很危险的哦。
9. 名侦探柯南
毛利兰
小兰的头发就无法言语了....
所以说不要轻易去拨弄女孩子的头发,几条命都不够你活的。
输掉25亿身家后,她还是富婆
张兰从未为自己购买过保险。
她总是相信,要实现梦想,就得义无反顾。
只要上帝知道她的梦想,就不会让她病,不会让她死。
张兰身上一直不缺标签。
她是汪小菲的生母,艺人大S的前婆婆,俏江南的创始人。但鲜少有人知,她作为“张兰”本身的奋斗之路与爱恨情仇。
自1992年在北京第一家“阿兰酒家”开始,今年已是张兰投入在餐饮行业的第30个年头。
三十年间,张兰经历着人生的大起大落,数次处于生死边缘,曾登高跌重,也曾饱受非议与冷眼,所幸她总能坦然面对。
在风云莫测的世界中,掷地有声地活。
如今实在称不上张兰的黄金时代。
鼎盛时期的张兰,拥有中式高端餐饮巨头“俏江南”和以奢华格调著称的“兰会所”。
她曾以16000页的标书打败一众竞争对手,为“俏江南”赢得2008年北京奥运会唯一指定中餐供应商的资格;2008年北京奥运会开幕后的第三天,各国首脑均汇聚在“兰会所”,张兰以会所女主人的姿态,忙前忙后地张罗着餐食服务;英国前首相布莱尔曾四次光临“兰会所”,还对“富贵鸡”这道菜颇为感兴趣。
张兰与李嘉诚(上)、英国前首相布莱尔(左下)、英国安德鲁王子(右下)
以张兰名字命名的“兰会所”成为了身份和品位的象征。
那里有上万元一只的巴特瑞手工雕花水晶杯,几十万元一盏的吊灯;天花板上悬挂着300余副巴洛克时期的名画,把“兰会所”装点得富丽堂皇,宛如一家艺术品的陈列殿堂。
奥运之后不久,张兰荣登2009胡润餐饮富豪榜的前三名,财富估值达25亿。一年后,她的儿子汪小菲与大S闪婚,2011年3月在海南三亚举行婚礼。
事业正盛,儿子终身大事完成,身边名流巨贾接踵,世家新贵比肩。
那段日子,即便从今天看来,依旧是张兰这一生中最为幸福的时刻。
儿子的婚礼上,她华服加身操控全场,就连一向以强势伶俐为台湾媒体称道的大S母亲,都只能安静在一旁,看着张兰大出风头。
张兰一家
性格因素之外更重要的是,张兰的底气的确足。
儿子能够迎娶当红女星,婚礼有四方名人捧场,均是基于她打下来的家业,那是她一盘菜一盘菜炒出来的江山。
忆起往日种种,人们总爱说张兰如何高调,却总容易忽视一个女人何以有了如此“高调”的资本。
凡世间事,总须先有“高”而后才可论“高调”。张兰佝着身子在后厨刷碗洗碟抓老鼠的那些日子,低到尘埃。
来日起的高楼,无不是张兰抓住一个“勤”字所得。
张兰常说,餐饮是“勤行”。张兰的勤,有目共睹,从根上讲,这是她童年的特殊遭遇历练出的结果。
张兰从出生便没见过亲生父亲。
还在母亲孕中时,张兰的生父被打成“右派”,被迫进行劳动改造,从一位清华土木系教授生生成为了一名泥瓦匠。
张兰的奶奶因此将张兰视作“祸根”,还未见过她的面就给她起名“小方人种”,意思是专会“方人”,不吉利,将家族的没落统统算在尚是婴儿的她头上。
少女张兰
不招奶奶家待见的张兰,只得一直住在姥姥家。姥姥心疼张兰从小没有父亲,对张兰格外留心。姥姥一家早年是正黄旗的一个大家族,规矩礼数甚多,对张兰的要求也是“坐有坐姿,站有站相,讲究体面分寸”,这些习惯伴随了张兰一生。
即便如今拍摄短视频和直播,出席一些非正式场合,张兰依然会格外关注自己的穿着打扮,说话甚是正式,成为今时的年轻人认为张兰总是“太过隆重”、“戏精”的来源。
五岁那年,张兰见到了继父。继父是化工行业的工程师,说话办事很是严谨,对张兰也实行一套“量化教育”。
张兰有一张作息表,是继父亲自拿小竹尺打的表格,从起床到睡觉,时间安排具体到每一分钟:早上六点起床,六点到六点十五擦父亲的28自行车,六点十五到六点半擦桌子......学习内容也是严格量化,每天临摹三十个大字,练熟以后增加到了一百个。
不到十岁的时候,张兰就被继父要求学习打毛衣,用毛衣针给他织毛背心。后来张兰成为了一等一的“打毛活儿”高手,画报上的图样,她看一眼就会织。儿子汪小菲从小穿的毛衣,都是张兰亲手织就。
早年张兰
文革初期,张兰母亲被打成“现行反革命”,在一天上班后就没有再回家。
彼时弟弟已经出生,照顾的责任也落在了张兰肩头。按照大人的嘱咐,张兰给弟弟两个小时喂一次水,四小时喂一次奶,除此之外还要给一家人做饭,做完继父布置的作业。
严格的家庭生活,让张兰即使在动荡的文革时期依然保障了学习时间,两个月后母亲被下放湖北“五七干校”,张兰和父亲只能一同前往。
干涸的日子里,艺术和文学是那么遥不可得。继父想了一个办法,将家中的留声机拆成零部件,用一张张撕下来的书页包裹着,偷偷带到湖北。
那些书页,是张兰一张张撕下来的“中外文学名著”,为了减少麻烦,这些书只能“肢解”后编号带走。若非在那样一个特殊年代,很难想象人们为了精神追求付出过怎样离奇的努力。
少女时期的张兰爱好打篮球
在湖北下放的日子里,继父喂猪、母亲种菜、张兰放牛。南方潮湿,母亲的风湿病也越来越重,张兰为了多分担农活,挑水、插秧、收割样样都抢着做。
弟弟年纪尚小,因为“下放”条件艰苦,长期营养不良,张兰会琢磨给弟弟改善伙食。夜里摸着黑,拿个手电、扛个面袋子,张兰就去水田里给弟弟抓蛤蟆。
那时田埂上多的是狼和豹子,张兰唯一的武器便是手里的手电筒。看到光,猛兽就不敢靠近,与狼同行久了,有时候出门看不到狼,张兰还会觉得不适应。
与狼和豹子相比,蛇就显得“小菜一碟”。十几岁的张兰常常在田鼠洞前等着抓蛇,先用棍子一顿打然后一把掐住“七寸”,从蛇张开的大嘴中拔掉毒芯。
越是毒蛇越肥,张兰越兴奋,都说蛇能治疗风湿,她紧着抓回去给妈妈吃。
张兰(第一排左七)与湖北安陆县一中同学们的毕业合影
人说“穷人的孩子早当家”,特殊时期的历练,对张兰本就机灵泼辣的性格起到了约束磨砺的作用。
从少女时期起,她已无意识中将照顾一家老小,改变家庭命运的责任放到了自己肩上,为自己日后的处世打上了勤劳和吃苦的底色。
1988年,远在加拿大的舅舅和舅妈回国探亲,见识到了张兰的能干。
那时的张兰年方30岁,不仅长得精神漂亮,还将老人孩子照顾得妥妥帖帖,里里里外外料理得井井头条,令谁看都是持家的一把好手。
如此能干的外甥女让舅舅一家印象深刻,临回加拿大之前,舅舅向张兰提议来加拿大生活一段时间,舅母身体不佳,正需要人照顾,张兰也可以借此名正言顺地申请一个探亲签证。
张兰黑白艺术照,曾在王府井“中国照相馆”橱窗中展示
八十年代末,出国对于绝大多数中国人都具备着绝对的吸引力。那个陌生世界的收入水平和繁华面貌令张兰动心,她心中一直存着的那个想要彻底改变一家人生活现状的梦想再次开始升腾。
唯一的牵挂便是儿子。彼时汪小菲方才八岁,正是需要母亲的年纪。但机会稍纵即逝,安逸的现状与不确定的未来之间,张兰左右犹豫还是选择了后者。
临去加拿大前,张兰带着汪小菲去了趟友谊商店,汪小菲指着一件黑色水貂大衣说,“妈,等长大挣了钱,我买给你穿!”
张兰心里涌起一阵酸楚,但为了脑海中的“更好的明天”,她不允许自己被情感击垮,作为“有本事的小兰”,她要出去带着全家的希望闯荡出一片天来。
张兰和幼年汪小菲
然而所谓的“出国闯荡”,在那个年代,最直接的就是挣钱。张兰一头扎进唐人街的餐馆,同时兼着几份工。
每天早上九点,送货的冷冻车过来,她要和一个印度男人一起将所有牛排扛下来放到冷库。每天36扇,张兰搬18扇、印度人搬18扇,每扇都有二三十斤。
在唐人街打黑工的华人当中,张兰绝对称得上是高性价比。她干活又快又好,力气大又刀工好,“粗活细活都能招呼”,一早上能切六筐胡萝卜丝、六筐土豆丝。
在加拿大的那段日子,张兰要求自己没有娱乐、没有享受,她每天工作12小时,挣的钱几乎全部都攒了起来。
挣钱之外,徒剩乡愁。
多伦多的秋天最美,大片大片的枫叶飘落,出国第一年的张兰穿一件黄色的风衣在公园中对着如画的美景落泪。
张兰对儿子的思念尤甚。她把汪小菲的照片倒扣在床头,每次都掀起来看一秒钟就赶快扣下,异国他乡,她太怕亲情击垮她最后的防线。
早年张兰
她暗自给自己下了目标,挣够两万美金就回国。
正是因为这样的信念,即便后来张兰夺得了“美加地区华人选美大赛”多伦多赛区的冠军,她还是没有选择继续留下参赛,她瞄准的,是自己的账户余额。
视钱如命,就是那两年的张兰最准确的心理状态。终于在1991年的秋天,张兰的账户终于达到了两万美金。
1991年12月22日,张兰落地北京。见到儿子,张兰想的第一件事就是带他“开眼界”。
给汪小菲穿上一件漂亮的灰色毛衣,张兰领着他去王府饭店过了人生中第一个圣诞节。西餐太贵,张兰给儿子点了一份黑森林蛋糕,很小的一角,35块钱,坐在餐厅外围的高脚椅上吃。
张兰在加拿大
终于和儿子团圆,想着这两年挣来的两万美金,张兰创业的心情就更为急切。
她想给儿子更好的生活。
当一个人,心中有着决绝的目标时,爆发出的能量是超乎想象的。在那个创业还并不流行的年代,张兰莽莽撞撞开始了自己的探索之路。
裹着红纱巾、骑着28自行车,张兰在漫天黄沙的北京城到处找店面,在“东四”路上,张兰豁然发现一张大白纸,上面刊登着店面出租的广告。
那是一个102平米的粮店,对面正对着的,是健力宝。
张兰即刻选定了位置,打算做精品川菜。那个年代,川菜尚不像如今一般流行,给人往往是低端、不入流的印象。
除了高端的粤菜餐厅,一般饭馆总是光膀子的人进进出出,大夏天汗味和厨房的油烟味充斥整个空间,张兰想改变这一切,她想将自己的第一家餐馆打造得有品质,首先就体现在装修风格上。
张兰和“阿兰酒家”
记忆里的南方,少不了水和竹林。为了找竹子,张兰买了张火车票,独自一人就去了成都。
但是人生地不熟,那时的通讯网络也不像如今这般发达,张兰只能靠打听,“全凭一张嘴”。
在火车上,张兰一路都泡在乘务员休息室,跟列车长打听各种四川的情况,从而确定了自己的第一个目的地——郫(pí)县。
盛产豆瓣酱的郫县也是竹子的重要产地,张兰在当地雇了七八个竹工,砍了上百根碗口那么粗、长达十三四米的竹子,用卡车运回成都再转火车。
如同打了胜仗的将军一般,张兰带着一火车皮的竹子和十来个工人回了北京。
削竹子、劈竹片、编竹子,张兰用了十天时间,将租下来的店面装点一新,她还在墙上挂上了一幅半裸女人跳着草裙舞的壁画。
1992年夏天,“阿兰酒家”正式开张。当时店中最受欢迎的一道菜是蛇羹,有着从小捕蛇的功底,每当客人点了哪条蛇,张兰就要亲自上手,一把把蛇拽出来,在空中一甩宛如杂技表演。
张兰成了远近闻名的“玩蛇的女人”。阿兰酒家的生意也水涨船高,最高时一天流水便可达到四万元。
那可是上世纪九十年代。餐厅的所有账目,均由张兰的弟弟亲自核算,八年来从未出错。
算是得偿所愿,张兰赚到了第一桶金,可没成想这笔钱却为她挚爱的弟弟带来了杀身之祸。
1999年6月7日,张兰弟弟下班后被歹徒在家中楼道连捅16刀,不治身亡。
自己看着长大的弟弟如此惨死,张兰的情感世界轰然坍塌。
半年后,案子方才昭雪,原来那伙歹徒早就盯上的是女老板张兰,踩了几天点之后,张兰突然出国去看儿子,歹徒方才转换了目标向弟弟下手。
张兰至今认为是弟弟替自己挡过了这场“血光之灾”,二十多年过去,张兰仍然不敢看弟弟的照片,不敢直面关于弟弟的回忆。
弟弟的逝去,让张兰消沉了数月。
她曾一个人去西藏想要寻求解脱,到了才发现,那里有太多如她一般的人,想要上天帮忙解脱的人那么多,但最终还是要自己走出来。
在生命的废墟之中,张兰第一次感到了绝望。她无法原谅自己,无法原谅上天的安排,但能够替弟弟往下走的,也只有她一人。
她将阿兰酒家和其他两家分店出售,也抛售了自己早年购入的所有股票,拿着全部的积蓄,她开始了新一轮的创业。
湖北下放的日子,继父常常让张兰晚上蒙在被子里听留声机里播放的《蓝色多瑙河》,一开始张兰总被捂得满头汗,不住地哭。
如今来看,在那样艺术、文学土壤都贫瘠荒芜的时代,老旧的留声机传出的音乐声和那一张张撕下的纸页,为张兰在心中保留了一颗文化的种子。
这颗种子,让张兰有了为之追寻一生的价值。她做餐饮,不满足于只是做人吃饭喝酒的喧闹场合,她希望能做出餐饮的文化感。
失去弟弟后,张兰将全部精力投入了新的餐饮品牌打造,“俏江南“就诞生于张兰如此“置之死地而后生”的人生阶段之中。
张兰和汪小菲
在北京土生土长的张兰,行事做人却有股子四川的麻辣味道。
成就她的也是川菜。
2000年4月,一家以川剧变脸脸谱为logo的艺术餐厅,在北京国贸的高档写字楼里开业,短短7年间俏旋风刮遍全国,迅速发展成为遍布全国、拥有20家直营店的餐饮集团,而张兰也一跃成为时尚餐饮界的领军人物。
那七年,应该是张兰人生中最为快意的时光。
她将俏江南定位于高端精品川菜,服务员上菜时候都要报出中英文并讲解每道菜背后的文化意味,而后打造的“兰会所”更是将餐饮业所追求的文化感做到了极致。
“兰会所”内景
繁复华丽的兰会所吸引了各界媒体的关注,2007年接受陈鲁豫采访时,张兰曾骄傲地讲道,“我们现在全部是自有资金,没有一分钱银行贷款”。
一语成谶。
那时候的张兰不会想到,十年后,凝结着她半生心血的“俏江南”品牌将全然不属于她,并且“输都不知道怎么输的”。
长期以来,张兰对于外来资本都保持着高度警惕。在2008年之前,张兰始终百分百控股俏江南。
2011年年中,新婚后的汪小菲正式担任俏江南CEO,俏江南递交A股上市申请,未果后,次年转战香港上市。
张兰和汪小菲
也正是在这一过程中,出现了张兰变更国籍事件。
为了符合法规的情况下尽快完成H股上市,张兰被建议以三十万美金投资移民,在三个月内完成国籍变更。
在外界看来,这一举动与张兰爱国企业家的标签南辕北辙,对张兰自己而言,则是特殊时期下为了符合政策规则上市做出的无奈之举。
“ 若不是为了上市,谁愿意放弃中国国籍当岛民?如果我有更好的办法帮助俏江南更快上市,我一定会去做。”
然而心心念念的上市并没有给俏江南带来好运,张兰很快遭遇了欧洲私募基金的“空手套白狼”。
俏江南的经营状况也急转直下,张兰陷入资本困局。
无疑,2011年之后的十年,对于张兰来说,是残酷的。
一个在五十岁已然达到25亿身家的女企业家,在人生的后半程却因资本游戏而将毕生心血尽失。
董事长的职位被否决、资产被冻结,那几年的张兰头一次体会到了什么是失眠的滋味。
从前做企业,张兰从来都是累得睡不醒,“俏江南”出事后的日子里,张兰每晚都要靠安眠药才能入睡,并且两片药只能维持两小时睡眠,她便又会在巨大的恐惧中惊醒。
俏江南“非典”期间都不曾歇业
最艰难的日子里,张兰每天把自己关在佛堂里祈祷、礼拜,只为减少心中的折磨。
要好的闺蜜去印度曾参拜了一位上师,张兰请求闺蜜帮她询问出路,上师送给张兰一个护身符和一句话,“去战斗吧!”
2020年末,张兰再次活跃于台前为自己的新品牌站台,那年她已62岁。
做了三十年餐饮,她又从头再来。
新媒介时代,她拿出年轻时切萝卜丝的劲头见缝插针地拍视频、直播。
最受欢迎的视频,是她的“豪宅菜板”系列。她站在装潢精美的厨房里,穿着大牌华服,带着项链和耳环,做好妆发,只用一个小菜板、一个小电锅做出各种各样的家常美食。
她炒土豆丝、做小花卷、闭眼切蓑衣黄瓜、穿着几千块一条的真丝衣裙,还不断叮嘱粉丝“大家学着做饭啊”,搭配上张兰招牌式的灿烂笑容。
豪宅华服令人眼花缭乱,专业的刀工和厨艺,又在昭示着她不易的曾经。
直播推销自家产品,张兰从未有过名人直播时常有的“放不下身段”的扭捏。
曾和她一起出镜《妇女能顶半边天》纪录片的其他三位嘉宾董明珠、杨澜、周忆,在带货直播中没有一位看起来可以像张兰一般热络、自如。
她从不掩饰自己要为品牌做宣传的目的,做实业出身的她,视“勤恳”为生命线。
张兰出席活动
网友们乐于站在高处,俯瞰这个住在豪宅里还在努力赚钱,人生第三次创业的老太太,寻找她的各处尴尬与破绽。
无论是被外界揶揄已久的“假装给大S打电话”事件,还是“儿子离婚上热搜张兰还在直播带货”的新闻,如此明晃晃地“营业”,总被有着更高媒介素养的潮流年轻人“打假”。
与此同时,很多人忘了,她已经六十四岁。
同龄人都在注重养老健康之时,张兰还在精神矍铄地对着对着直播间的数万人,大口吃着自家的酸辣粉,边吃边解说“酸酸辣辣地才过瘾”。
时代变幻,如今电子支付日渐取代纸币、外卖早已超过堂食,她却还是那个骑着二八自行车、围着红纱巾,在漫天黄沙的北京中到处找店面的阿兰;是那个在异国他乡,一个人扛18扇牛排的“能干小兰”。
她称得上是赤手空拳、白手起家,以数年的拼搏勤勉为自己的前半生创造了无数高光时刻。
人到老年,事业遭遇重创,儿子婚姻画上句号,孙子孙女亦常年不在身边;她终日在毁谤和是非的漩涡中挣扎,依旧在努力寻找出路。
从传统的观点来看,张兰的晚年境遇称不上圆满。
然而,走出阴霾的路上,张兰骁勇泼辣的行事作风未变。她敢战、愿战,年过花甲依然有憋着一口气也要挣出一份好家业、好生活的精气神。
这份宝贵的生命力,令人感佩。
“生命的力量在于不顺从。”张兰做好准备,预备继续像战士那样活着,迎接未可知的一切风雨。
她愿相信,自己像猫一般,“有九条命”。
小兰翻墙抓手PRRSV受体--猪病小兰的时空之旅【连载-13】
Tips:
1.单核巨噬细胞是PRRSV的主要靶细胞;
2.至少有6种与PRRSV感染相关的受体,最重要的是清道夫蛋白(CD163)和唾液酸粘附素(CD169)
3.CD163受体敲除或编辑是抗PRRSV的终极必杀技
虽然一直没有太多时间看电影和美剧,但是Game of Throne(冰与火之歌)还是每季都抽一个晚上一口气扫荡掉的。其中具有视觉冲击的景很多,但最震撼的还是抵御“winter”的那堵冰墙,不过最让人担心的是墙脚下那供人出入的门。
如果易感细胞是一个四面围绕的城池,那病毒总能找到那个潜入其内的楼梯或者地下通道,而且习得那句“芝麻开门”的密语。易感细胞上的病毒受体就像攀岩墙上的抓手,病毒总能通过他找到翻墙进入的路径。今天就来唠一唠,PRRSV小兰感染的宿主细胞、入侵方式和所用的受体。
【靶细胞】
PRRSV在体内主要感染单核(monocyte)/巨噬细胞(macrophage ),但巨噬细胞分化和发育程度不同,易感性不同。其中猪肺泡巨噬细胞(PAMs)是PRRSV的主要靶细胞,脾脏、扁桃体、淋巴结、肝脏、派伊尔结(Peyer’spatches)和胸腺中的巨噬细胞也对PRRSV易感,但是腹腔巨噬细胞、新分离的血液单核细胞、骨髓中的前体细胞(progenitor cell)对PRRSV不易感。除此之外一些生殖相关的细胞也能感染。同时血液中分离的单核细胞经过体外细胞因子的活化处理,可以变得对PRRSV易感,成为一种体外培养的原代细胞,但应用少于肺泡灌洗液中直接获得PAM。
PAM细胞和MARC-145细胞(来自于猴的肾脏上皮细胞,从MA104中克隆出来)是我们用来病毒分离最为敏感的细胞。但是很多欧洲型毒株以及部分美洲型毒株在MARC-145细胞中是不感染增殖的,但PAM细胞则对什么类型的PRRSV病毒都敏感,不挑。除了这两种常用细胞外,还有一个是来自于永生化的巨噬细胞系3D4/21,以及BHK21细胞通过转入PRRSV的受体分子CD163获得易感性。关于这个其实还有一个商业故事,当时在美国知名的B公司最早申请了MARC-145培养PRRSV病毒的专利,所以只要用这个方法做疫苗就会被告,因此市场上一直都只有他家的疫苗,另外一家美国本土公司为了突破这一封锁,直接将PAM细胞的cDNA文库转导BHK21细胞(PRRSV能复制不能侵入的细胞)里面,筛选出转染PAM 细胞蛋后获得易感性的BHK克隆,然后通过测序破解了PAM重要的受体分子CD163,同时获得了一个能够让PRRSV增殖的细胞系,进而开发出一个能够突破专利保护的PRRSV疫苗,虽然最后还是卖不过先入为主的【PRRSV受体】
目前为止有6种分子被认为可能是PRRSV感染的细胞受体,其中包括唾液酸粘附素(Sn或者CD169),硫酸乙酰肝素(heparansulphate,HS), 波形蛋白(vimentin), 清道夫蛋白(CD163),CD151,以及树突状细胞表面的DC-SIGN ( CD209)。其中CD163和CD169被认为最为重要。各个受体发现的故事就不一一赘述了,Ghent大学Hans教授的一张图就非常漂亮地总结了这些受体,Boss Yang肖老师和田老师我们编的PRRS专著中也引用了它。现在普遍认为CD163是这些分子中最重要的受体分子,与病毒的脱衣壳释放基因组到细胞中相关。除了这些受体以外,其他一些宿主分子也与病毒的感染入侵相关,比如哈兽研的王玉娥(本人师姐)和封文海老师分别报道的MetalloproteaseADAM17和microRNA181都可调控CD163的翻译表达,周恩民老师团队发现的MYH9对PRRSV感染具有必要性。
有报道干扰胞内体酸化的试剂可抑制PRRSV在PAMs、MARC-145细胞内复制的早期步骤,这也是几个抗生素类产品号称能够非特异性抗PRRSV所宣称的原理。内噬特异性抑制因子氧化苯胂处理也能抑制感染。总的说来PRRSV都是以受体介导的网格蛋白依赖性的内噬作用侵入细胞的。
可以总结一个PAM细胞的感染模式:病毒与硫酸乙酰肝素黏多糖结合,这种相互作用虽然不会引起病毒内化,但是增加了细胞表面病毒粒子的浓度,并促进病毒与唾液酸黏附素的结合,从而增强病毒的内化和感染。之后,在唾液酸黏附素的作用下,病毒通过网格蛋白介导的内噬途径(clathrin-mediatedendocytosis)而侵入巨噬细胞。最后,在巨噬细胞内部因子的参与下,与CD163 相互作用,发生膜融合,释放病毒基因组,启动病毒复制。
【病毒配体】
早期肝素-亲和层析证实过主要结构蛋白M-GP5能够与肝素样受体结合,早期研究中和抗体时也多集中与GP5,很多早期的亚单位疫苗也都用它作为靶标,但可惜HS仅能结合,并不辅助内化,所以当前更多的研究认为次要结构蛋白GP2、GP3和GP4才是与CD163结合促进病毒宽衣解带,对细胞嗜性(病毒的品味)至关重要的分子。以前总是觉得GP5变异那么大,一定是有选择压力作用在上面(比如中和抗体针对的表位),可能突变与免疫逃逸相关,推出GP5应该在感染中很重要,只是我们还没搞清楚罢了。直到有一天在吴晓波频道听到一个故事,二战期间英国让数学家分析轰炸德国返航的幸存飞机,发现机翼很多弹孔,但机尾毫无损伤,数学家算完之后,报告说,必须加强机尾设计—一个貌似脑袋被门夹了答案,仔细想过才恍然大悟,这就是传说中的“幸存者偏差”,那GP5那么多突变而GP2、3、4却相对少些,是不是因为GP2、3、4突变的病毒都结合不了受体,都没有机会复制出来被分离测序了。
【受体改造】
很早的一篇公众号也写过Randall S. Prather 团队的人通过CAS9敲除CD163之后能够让改造后的猪不感染PRRSV,后来爱丁堡团队做的更细,发现替换CD163的SRCR domain5 也能避免感染。其实国内也有团队做出这样的仔猪了。每当我们冥思苦想抗病毒策略的时候,想到人家玩动物的已经釜底抽薪将所有问题都直接解决了,便不尽伤感又高兴。心想,小兰小样的,我们弄不死你,总有人弄死你吧。
CD163受体编辑猪前景如何? 单选 0人 0% CD163敲除猪迟早要上桌,PRRSV别搞了 0人 0% CD163编辑的猪,难说PRRSV换个受体又感染了 0人 0% 不明觉厉,只打酱油
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作者:周磊(猪兽医&研PRRS)
中国农业大学动物医学院
小蓝单车,0.5元/h,扫码3秒开锁,押金比摩拜便宜200!
“从野兽骑行开始,我就一直关注中国自行车领域,此次共享单车大潮来临时,小蓝单车的规划也应运而生,我们认为这是一个极好的契机,能让更多的人重拾对自行车的关注”小蓝单车联合创始人李刚说道。
前段时间,野兽骑行宣布正式进入共享单车领域后,在深圳发布单车品牌Bluegogo(小蓝单车),跻身共享单车大战阵营,前有摩拜单车、ofo,后有优拜、小鸣单车等,此时小蓝单车的进入似乎略显尴尬,这仗怎么打才能让用户接受自己?
产品能力和供应链
共享单车大战的决赛点在于“产品能力”和“供应链”,小蓝单车怎么破?
产品能力直接决定产品体验,相比于它的前辈们,小蓝单车主要发力好骑、安全、快速解锁三大产品体验特点。
✦好骑:
小蓝采用橡胶外胎 PU实心内胎,轻便的同时能有效降级颠簸感。车架车轮均采用了高强度、轻量化的6061铝合金,使用效率较高的链条传动,配备可以承重25kg的车篮,满足用户载物的需求。座椅更是使用了意大利品牌SelleRoyal(全球最顶尖的知名坐垫品牌)的硅胶坐垫,十分宽大舒适。
✦安全:
安全是自行车在城市出行中最大的挑战,刹车是否灵敏,车体强度是否足够,都关系到骑行者的安危。从目前来看,传统V刹面临着磨损快难以及时维护的困境。
而小蓝单车使用鼓刹 罗拉刹车的组合,其中罗拉刹车是专为城市休闲车发明的刹车系统,具有效率高、刹车反应速度快、操作轻便、故障率低的优点,从共享车产品安全性的角度来说,算是当前较优的解决方案。
✦快速解锁:
共享车如果没有电子锁的定位找车和智能计费功能,根本无法实现便利使用。小蓝则采用较为先进的算法,可以实现3s内解锁。
小蓝单车是从野兽骑行剥离出来的,野兽骑行的技术和供应链都将为小蓝单车提供支撑。所以,原野兽骑行在惠州的工场将以年产50万台的速速为小蓝单车提供支持。
另外,小蓝单车还有6-8家供应商配合的组装厂,有几十个供应链的合作伙伴。“组装车和惠州工场生产的单车是一样的,两种生产方式的综合起来日产能可达20万辆”,李刚告诉邦哥。
如何与摩拜、ofo等共分羹
共享单车领域的情况是摩拜和ofo已经在多个城市铺了很多辆单车,而ofo下一步还将进入广州和深圳,摩拜之前已经进入,对小蓝单车而言,至少速度上确实是晚了很多。
而李刚似乎一点都不担心目前的局面,“我认为这个战场做好这三件事非常重要”:
第一点是密度。一个城市铺的密度决定用户体验,决定密度的是速度,决定速度的是生产、供应能力,归根结底取决于供应链能力,对于小蓝单车而言,拥有的是日产1万台车的能力。
第二点是产品体验。小蓝单车从骑行体验、免维护性等各个方面都进行了考量。“12月份进驻广州的时候,小蓝单车还会推出新品,”李刚向邦哥透露。
第三点是运营能力。怎么样让更多的人进来,怎么让更多人玩,怎么组织好活动和做品牌的事情是关键,目前公司已挖来20多人负责这方面的事情。
另外,为了维护共享单车整个市场健康发展,小蓝单车还正式提出了《共享单车公平竞争文明公约》,约定各方“三不”,即“不毁坏/不围堵/不私藏”,并倡导用户对共享单车“三文明”即“文明使用/文明摆放/文明爱护”,倡导共享单车行业组建成共享单车行业联盟,与政府共同推进在单车停放地点以及城市绿道建设等方面上的合作,让共享单车真正服务于城市,让城市更美好。
目前小蓝车在深圳试运营的第三天车辆投放超过3000台,车辆被使用次数超过5万次,App使用次数超过30万次。
李刚,野兽骑行创始人兼小蓝单车联合创始人,在骑行领域拥有多年经验,团队其它主要成员在自行车行业有10多年的经验。野兽骑行已经完成1.5亿元B轮融资,一部分钱将投入小蓝单车的市场运行中。
[动漫资讯]网友:柯南的红方阵容是不是太强了
【一万光年动漫电台新闻组:整理发布 阿大】
在当年我们刚开始看《名侦探柯南》的时候,或许会有种我方只有一个小学生,黑衣组织势力庞大的感觉。但伴随着连载,越来越多我方成员出场,这也让日本网友忍不住吐槽:红方阵容是不是太强了?
1:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:28:52.704 ID:/G3ieuh40.net
工藤优作(就连新一都承认,他爹的头脑是最强的)
工藤有希子(拥有不输给苦艾酒的变装技巧的名人)
服部平次(拥有不输给工藤的智慧,头脑顶级)
服部平蔵(大阪警察的老大,比平次实力还强,而且拥有庞大的权力)
毛利小五郎(知名度很高,跟警方关系密切,偶尔也很强)
毛利兰(拥有顶尖的战斗力)
妃英理(拥有法律界女王的称号,在洞察力·观察力方面都很强,头脑也好)
铃木园子(压倒性的经济实力)
阿笠博士(知名发明家,能够开发变声器、脚力增强球鞋等外挂)
灰原哀(我们中出了一个叛徒)
京极真 (连子弹都能躲,在国内没有对手,战斗力全作品最强)
赤井秀一(FBI、最強狙击手、连黑衣组织老大都怕他,拥有大量黑衣组织情报)
世良真纯(拥有顶尖的头脑,战斗力也不错,另外似乎也掌握了很多黑方情报)
FBI3人组(虽然没啥能力,但情报网和机动力都非常不错)
水无玲奈(我们中出了一个叛徒)
安室透(我们中出了一个叛徒)
怪盗基德(连安室都能欺骗的变装达人,强大的机动力)
2:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:29:19.406 ID:/G3ieuh40.net
既然你这么说了,那我列举一下黑方的吧:
那位先生(从来没看到有什么行动,似乎在政坛有影响力,但并没有什么卵用)
兰姆(开始渐渐有所行动,但是行动一直在失败,渣渣)
琴酒(拥有作品顶尖的头脑,但总觉得哪里不太对。射击能力很强却比不过赤井,渣渣)
伏特加(干事情居然会留指纹,这一点就足够无能了)
科恩(除了感觉像个基佬,没印象)
4:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:30:34.966 ID:tTjGfODDd.net
双方实力差距如此悬殊,居然20多年连载都没把黑方干掉,这一点反而不可思议。
20:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:39:22.448 ID:xitxpMYa0.net
你们不说我还真的忽视了园子势力,看她家那帮人花钱根本不当回事,如果用钱组织雇佣军至少都能凑几万人出来吧?京极真似乎不光在日本很强,也经常去国外踢馆的样子。
10:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:32:33.810 ID
f6PBKPI0.net
如果基德以后还继续参与主线,说实话黑方真没办法玩。毕竟基德那边可是有个魔女啊!直接占卜一下黑方老大是谁,然后报警结局吧。
18:以下、(^o^)/でVIPがお送りします2016/03/04(金) 00:36:16.661 ID: sm79n310.net
其实光是看声优阵容,就知道柯南一方根本无人能够阻挡了……
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